在发生火灾、自然灾害和其他与高温有关的事件时,骨头和牙齿是识别人类或动物尸体的唯一遗传物质来源。为了获得可靠的最终鉴定结果,使用合适的核酸提取方法是至关重要的。因此,本研究的主要目的是评价从动物烧伤骨骼和牙齿中分离DNA的选择方法的有效性。此外,还确定了高温持续时间对这些组织中细胞核和线粒体DNA稳定性的影响,以及利用获得的遗传物质对起源不明的遗骸进行物种鉴定的可能性。在狗的尸体解剖过程中收集的骨头和牙齿在实验室烤箱中400°C(752°F;673.15 K) 5、10、15、30、45、60分钟。DNA分离根据四个不同的协议,使用三个商业工具,即PrepFiler®法医DNA提取工具从应用生物系统公司的QIAamp®DNA从试剂盒调查员工具,从群体和DNA迷你工具,以及一个经典有机方法。通过Real-Time PCR和NanoDrop™分光光度计测定分离的DNA的数量,比较了这些方法的有效性。每株分离物均采用PCR扩增犬线粒体DNA片段。该方法具有最佳的DNA回收率,并被认为是分析困难材料的金标准,因此对物种鉴定的有效性进行了评估。QIAamp®DNA调查员试剂盒从骨头和牙齿中提取DNA的效率最高,烧伤15分钟(最长的烧伤时间,仍然可以从骨头和牙齿中提取DNA)。 The results of the experiment clearly indicate that DNA stability in hard tissues depends on how long they burn. In the case of exposure to 400 °C, reliable genetic testing, including species identification, is possible when the burning time does not exceed 15 min. Among the hard tissues examined, bones proved more suitable than teeth for identification purposes. It was also concluded that identification of bone remains with extreme heat damage should be based on mitochondrial DNA analysis.

参考文献

PubMed.